無(wú)菌接種步驟

  1.將初步洗滌及切割的材料放入燒杯，帶入超凈臺(tái)上，用消毒劑滅菌，再用無(wú)菌水沖洗，然后瀝去水分，取出放置在滅過(guò)菌的紗布上或?yàn)V紙上。

  2.材料吸干后，一手拿鑷子、一手拿剪刀或解剖刀，對(duì)材料進(jìn)行適當(dāng)?shù)那懈睢Ｈ缛~片切成0.5cm平方的小塊;莖切成含有一個(gè)節(jié)的小段。微莖尖要?jiǎng)兂芍缓?～2片幼葉的莖尖大小等。在接種過(guò)程中要經(jīng)常灼燒接種器械，防止交叉污染。

  3.用灼燒消毒過(guò)的器械將切割好的外植體插植或放置到培養(yǎng)基上。具體操作過(guò)程(以試管為例)是：先解開(kāi)包口紙，將試管幾乎水平拿著，使試管口靠近酒精燈火焰，并將管口在火焰上方轉(zhuǎn)動(dòng)，使管口里外灼燒數(shù)秒鐘。若用棉塞蓋口，可先在管口外面灼燒，去掉棉塞，再燒管口里面。然后用鑷子夾取一塊切好的外植體送入試管內(nèi)，輕輕插入培養(yǎng)基上。若是葉片直接附在培養(yǎng)基上，以放1～3塊為宜。至于材料放置方法除莖尖、莖段要正放外，其他尚無(wú)統(tǒng)一要求。接種完后，將管口在火焰上再灼燒數(shù)秒種。并用棉塞，塞好后，包上包口紙，包口紙里面也要過(guò)火。